Puesta a punto de un equipo sonicador y su implementación en la técnica de ruptura celular de distintas especies de microalgas

Abstract

Las microalgas son reconocidas como fuente de bioproductos de gran importancia económica. Para su obtención es necesario desarrollar e implementar técnicas adecuadas para extraer, cuantificar y conservar metabolitos de interés biotecnológico. Una de ellas consiste en la disrupción celular para la liberación de biocompuestos. El objetivo que se plantea en este trabajo es determinar la efectividad de ruptura celular obtenida por el método de sonicación. Se utilizó un equipo de ultrasonido modelo JY88-II N, y se trataron las especies Scenedesmus sp, Chlorella vulgaris, Chlamydomonas reinhardtii, Dunaliella salina, y Nostoc sp pertenecientes al cepario del Laboratorio de Microalgas. Fueron sometidas a pulsos de baja frecuencia (20 kHz) y para evitar el aumento excesivo de temperatura durante el proceso se mantuvieron en un baño con hielo. Las variables consideradas fueron: presencia/ausencia de pared celular, tiempo (1- 20 min) y potencia de sonicación (150 – 200 W). La densidad celular fue evaluada en cámaras de conteo, registrándose el estado de las células al inicio y al final del procedimiento mediante cámara fotográfica adosada al microscopio óptico con el software correspondiente. Se determinó el índice de sonicado (ηS) para valorar la eficiencia del proceso, calculado a partir de las densidades celulares iniciales y finales (Ni y Nf). C. reinhardtii, D. salina y Nostoc sp presentaron liberación del contenido celular en 5 minutos de sonicado con una potencia de 150 W, resultado que se corresponde con sus estructuras celulares carentes de pared. Mientras que Scenedesmus sp, y C. vulgaris requirieron mayor tiempo y potencia (20 minutos y 200 W), dada la presencia y naturaleza de sus paredes celulares. Se comprueba la eficiencia del tratamiento que afecta de manera diferente a las especies estudiadas según la presencia o no de pared celular, factor que condiciona la liberación de los componentes internos.